红细胞裂解液粉剂型

【产品名称】

流式细胞分析用溶血素(粉剂型)

【型号规格】

5包/盒,10包/盒,15包/盒

【预期用途】

用于流式样本前处理中的红细胞裂解。适用于外周血、骨髓等含红细胞的样本。

【使用方法】

用180ml蒸馏水充分溶解包内粉剂,定容至200ml即可。推荐100ul样本加入2ml配制好的流式细胞分析用溶血素。

【主要组成成份】

NH4Cl、NaHCO3、EDTA-Na2

【作用原理】

主要是利用离子形成细胞内外渗透压差,红细胞由于细胞结构较为简单,仅有细胞膜结构,对于膨胀的耐受能力较差,因此绝大部分就会被涨破,受到破坏。

【红细胞裂解操作步骤】

样本要求:

加入溶血素前应事先使用200目或300目尼龙滤网过滤样本,尽量保证样本为单细胞形式,无凝块、无大量脂肪滴等。

 

常用红细胞裂解步骤:

1. 在流式管中加入需要标记的表面抗体,与100ul外周血/骨髓样本避光、室温孵育15分钟。

2. 向管内加入2ml 1×流式细胞分析用溶血素工作液。涡旋振荡器上震荡混匀,静置10分钟。10分钟后可见液体呈澄清透明红色,300~500g离心5分钟,弃去上清,即可上机。

对于需胞内标记的样本,请参照胞内标记步骤。

 

大体积红细胞裂解步骤(适合需大量细胞的实验,例如MRD检测、分选等):

1. 使用15ml大离心管,加入13ml 1×流式细胞分析用溶血素工作液,接着

加入1ml外周血或骨髓样本。

2. 加盖、上下颠倒数次使其充分混匀,使用摇床水平摇动5分钟。

3. 300~500g 离心5分钟,确认细胞团块沉淀在底部,吸去上清,留下少量液体,避免吸掉底部细胞。

4. 再次加入10ml 1×流式细胞分析用溶血素工作液,加盖、上下颠倒数次

使其充分混匀,使用摇床水平摇动5分钟。

5. 300~500g 离心5分钟,确认细胞团块沉淀在底部,吸去上清,留下少量液体,避免吸掉底部细胞。

6. 加入1ml PBS重悬,计数细胞,利用PBS将细胞数量调整至1×107/ml,进行后续的抗体染色或分选操作。

 

【储存条件及有效期】

产品于室温保存,有效期2年。

【制造商】浙江博真生物科技有限公司

【生产地址】乐清经济开发区纬十七路261号

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